分享一下布美諾肽合成的具體步驟

　　布美諾肽為環七肽結構。大量研究已證實它們的受體分子在性喚起、降低食欲以及催化黑色素的合成中起著重要的作用，由此可以治療性功能障礙、肥胖以及刺激皮膚產生黑皮素抵抗紫外線灼傷等疾病。
 

　　布美諾肽合成具體步驟如下：
 

　　一：取CTC樹脂，加DCM充分溶脹后，稱取Fmoc-Lys(Boc)-OH加DMF溶解，冰浴下滴加2~3eq的DIEA活化后轉入樹脂中，7~10min后補加1eq的DIEA，繼續反應2h后，洗滌，加甲醇/DCM/DIEA封閉液封閉兩次，洗滌抽干，測量取代值。
 

　　二：將第一步樹脂投入反應柱中，加DCM溶脹，加20%PIP/DMF脫除Fmoc，DMF和DCM交替洗滌，用茚三酮檢測，結果應呈陽性；DMF/DCM=3/1作為反應溶劑，加Fmoc-Trp(Boc)-OH、HOBT溶解后，加入DIEA，10~10℃條件下下加入HBTU活化10min；活化后轉入反應柱中，常溫下反應1h，用DMF和DCM洗滌，用茚三酮檢測，結果應呈陰性；反應結束后，按照脫保護、洗滌、縮合循環進入下一步氨基酸的縮合,縮合的保護氨基酸依次為:Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-D-Phe-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Nle-OH；偶聯完成后脫除N末端Fmoc保護基，加乙酰化試劑封端，甲醇收縮，抽干。
 

　　三：按1g樹脂配置10ml全保護裂解液(1%~2%TFA/DCM或20%~30%TFE/DCM)，冰浴條件下加入樹脂，開啟攪拌；樹脂加入后撤去冰浴，恢復室溫反應1h。反應結束，過濾，樹脂用DCM洗滌兩次，合并濾液；向濾液中加入DIEA調溶液PH值至8-9，旋蒸拉干，加入預冷10%甲醇/水溶液沉淀，離心，打漿洗滌，抽干。
 

　　四：取上一步產物，加THF溶解，加入甲醇、三苯基膦溶解，通氮氣保護，冰浴下滴加DEAD，滴加完成后，撤去冰浴，恢復室溫反應4h。反應結束，旋蒸除去THF，加入MTBE析出，離心，打漿洗滌，抽干。
 

　　五：取上一步產物，按1g產品10ml的比例加入裂解液(TFA:Tis:H2O:苯酚=92.5:2.5:2.5:2.5:2.5)，室溫反應1h。反應結束，加入預冷MTBE沉淀，離心，打漿洗滌，抽干。
 

　　六：取上一步產物，加DMF溶解，加HOBT和DIEA活化，冰浴下滴加DIC，滴加完成，撤去冰浴，恢復室溫反應3h。反應結束，加入預冷MTBE沉淀，離心，打漿洗滌，抽干。
 

　　七：取上一步產物，加80%ACN水溶液溶解，加1mol/L的NaOH水溶液調PH至10，常溫下攪拌反應2h；反應結束后，加冰醋酸調PH至3，旋蒸除去ACN，加入MTBE析出，離心，打漿洗滌，抽干。用35%ACN水溶液溶解，鈦棒過濾后進行HPLC純化。